Fille de Charles I d’Amboise et de Catherine de Chauvigny. Née peu après la mort de son père. Issue d’une importante famille de Touraine.
Elle est mariée trois fois :
d’abord, très jeune, à Christophe de Tournon (sieur de Beauchastel, chambellan de Charles VIII)) qui meurt en 1499,
puis, du 10 novembre 1501 à 1541, à Philibert de Beaujeu (seigneur de Linières),
enfin à Louis de Clèves, comte d’Auxerre (1542-1545).